固相萃取-j9九游会官网登录

            前言

毒品问题一直是社会高度关注的焦点，污水中毒品及其代谢物的检测不仅能够反映当地的毒品滥用情况，更能反映某个特定区域禁毒工作效果，警方能通过污水毒品检测客观分析，构建毒情形势监测体系，有利于把控毒品发展态势，全面科学分析毒品滥用情况、确定毒情泛滥区域，进而强有力地推进禁毒工作。本文参考《污水中13种毒品及其代谢物的固相萃取方法研究》，使用莱伯泰科spe1000全自动固相萃取系统进行污水中的毒品及其代谢物的萃取处理，经m64高通量平行浓缩仪浓缩后用液相色谱-串联质谱检测，从而测定污水中毒品及其代谢物的含量，该方法能够快速、高效、稳定地达到实验的要求。

1、仪器设备

1.1 spe1000全自动固相萃取系统（莱伯泰科）；

1.2 m64高通量平行浓缩仪（莱伯泰科）；

1.3 sciex exion lc™液相系统 triple quad™4500质谱系统（sciex）。

2、试剂与耗材

2.1 甲醇：色谱纯；

2.2 乙腈：色谱纯；

2.3 甲酸：色谱纯；

2.4 浓氨水：色谱纯；

2.5 浓盐酸；

2.6 5%氨水甲醇溶液：量取氨水5ml，加甲醇稀释至100ml，混匀；

2.7 10种毒品及其代谢物标准溶液：各1000μg/ml；

2.8 10种毒品及其代谢物内标标准溶液：各100μg/ml；

2.9 玻璃纤维滤膜：1.2μm；

2.10 200μl内衬管；

2.11 微孔滤膜 0.22μm，ptfe ,labtech；

2.12 固相萃取柱： mcx柱（60mg，3cc）（莱伯帕兹， pz12702）。

3、实验过程

3.1 取样

将污水检材样品解冻并充分摇匀，加入浓盐酸调节ph值至小于2，使用溶剂过滤器和玻璃纤维滤膜过滤，取滤液待分析用。在固相萃取之前，取50ml已过滤样品加入100μl内标混合溶液（25ng/ml）。

3.2 固相萃取净化

按照图1所示的方法进行样品的固相萃取净化步骤，收集洗脱液待浓缩。

图1 固相萃取方法

3.3 浓缩

将固相萃取的收集瓶置于m64高通量平行浓缩仪中浓缩，按照水浴温度50℃、氮气压力1psi的条件浓缩至近干，加入0.1%甲酸水溶液250μl复溶，混匀后用微孔滤膜过滤，装于200μl内衬管中，供仪器检测。

3.4 标准曲线绘制

取与检材样品等量的自来水，添加混合标准工作溶液，使其中目标物的浓度为1ng/l、5ng/l、10ng/l、50ng/l、100ng/l、500ng/l,配制成标准曲线系列，与检材样品平行操作，经3.2、3.3的方法进行处理，供仪器检测。

3.5 液相色谱条件

色谱柱：shim-pack velox c18（2.7μm，2.1*100mm）；

流动相：a: 0.1％甲酸水溶液；b:乙腈；

流速：0.3 ml/ min；柱温：40℃；进样量：5μl；

洗脱梯度：0~6.0min，5%b；6~6.2min，25%b；6.2~8.0min， 100%b；8.0~8.2min，5%b；8.20~10.0min，5%b。

3.6 质谱条件

离子源：esi源，正离子模式；

离子源参数：

is电压：5500v； 气帘气cur:35psi；

雾化气gs1:55 psi ；辅助气gs2:60psi；

源温度tem:600 ℃ ；碰撞气cad:6。

4、结果和讨论

4.1 各种样品谱图

4.2 标准曲线

由上图可知，所有物质均满足相关系数r大于0.995，线性良好。

4.3 加标回收率

加标样品经固相萃取净化、洗脱、浓缩后，上机分析，定量，计算得到的加标回收率及相对标准偏差如表2所示。

5、结论

在本次实验中，由表2可知，10种毒品及其代谢物的加标回收率为78.0%~127.6%，相对标准偏差rsd为1.6%-9.6%，均满足要求。综上所述，使用莱伯泰科spe1000全自动固相萃取系统和m64高通量平行浓缩仪对污水中的毒品及其代谢物进行提取、浓缩，整个实验过程快速、高效。

本实验中，使用spe1000可以精准控制流速达到更好的萃取效果，并且在后续浓缩步骤中，无需转移洗脱液，可直接使用m64浓缩，减少了目标物损失，同时减少了实验的系统误差。

6、参考文献

谢刘洋,谢明仁.污水中13种毒品及其代谢物的固相萃取方法研究[j].广东公安科技,2021（4）:31-34。